做基因编辑和细胞功能研究，为什么越来越重视电转过程的可追溯性？

随着CRISPR基因编辑、RNA研究、细胞治疗和蛋白功能的研究不断进步，实验室对外源分子递送技术的需求也在发生变化。

以前我们更多的关注的是这样一个问题：

能不能把东西送到细胞里去？"

而现在我们一般还要继续追问：

每次能不能稳定地送进去呢？"

不同批次之间是否有可比性？"

“如果实验出现异常情况的话，可以找出其中的原因吗？""

因此，在越来越多有关基因编辑、细胞功能的研究项目的进行当中，电转染设备的重复性和数据记录能力变得越来越重要。

## 由单一的实验走向项目的开展，实验的标准也要随之改变

如果是第一次预实验的话，研究者可以根据需要不断地修改参数，直到得到满意的结果为止。

但是当项目进入到正式的研究阶段，特别是涉及到多个批次的细胞、多个实验组别或者多人合作的时候，仅仅依靠个人的操作经验和无法保证结果的一致性。

比如在不同的基因编辑实验批次中，如果脉冲过程有所不同，那么最后得到的编辑效率、细胞恢复状况以及之后的表型分析都会受到一定的影响。

此时，电转染仪已经不能仅仅是一个简单的高压脉冲发生器了，它应该成为整个实验的质量控制系统中的一员。

## 输出的实际参数值有什么意义呢？

在科研实验中，“设定参数"和“实际发生参数"这两个概念是不一样的。

研究者所设定的目标条件，并不是直接作用于样本上的，而是经过设备输出之后才产生的实际电脉冲。

V-leader 开云网页版登录入口 Gene Pulser 630 配置电脉冲参数检测与记录系统，可以实时显示脉冲波形，并且能够记录下实际电压、脉冲时间、脉冲间隔以及脉冲次数等信息。

这样的数据就可以和实验的结果一一对应了。

例如：

某一个实验组编辑效率明显下降，并且可以回看脉冲状态；

某一类细胞的死亡率上升了，可以通过比较不同批次的实际输出参数来得出结论；

不同的操作人员使用相同的方案的时候，也可以判断出实验执行条件是否一直相同。

可追溯性可以为建立标准的操作程序提供实际的帮助。

基因编辑除了要保证效率之外，还需要细胞可以继续进行接下来的实验

以CRISPR相关的实验为例，不管导入的是质粒、RNA或者其他分子的形式，转染本身一般只占整个实验过程的一半左右。

之后还会涉及到：

细胞恢复培养；

单克隆筛选；

基因型鉴定；

蛋白表达检测；

功能实验；

表型分析。

因此，在转染过程中对细胞的状态产生过大的影响时，即使短期内导入效率高，也会提高以后实验的难度。

指数衰减波电穿孔技术利用短时间的电脉冲来使细胞膜发生可逆性的通透性改变，从而为DNA、RNA、蛋白质等外源分子的传递提供了一个物理通道。

当参数适当的时候，在分子递送效率和细胞状态之间可以进行优化。

这也是电转染在很多基因编辑的研究中有着重要的应用价值的原因之一。

多样本项目的设备要具有统一的平台能力

实际上科研项目不会一直只用一种细胞。

今天可以进行细菌转化实验，明天则要对哺乳动物细胞进行处理，之后还需要建立起植物原生质体转化系统。

每一个样本都必须配备一套不同的设备的话，将会使实验室管理工作、人员培训和方法转移变得更加复杂。

Gene Pulser 630 可以对细菌、酵母、哺乳动物细胞、植物细胞以及植物原生质体等多种类型的样本进行电穿孔实验，并且针对常用的样本提供了相应的预设和参数调节方案。

对于综合性实验室来说，一个平台能够涵盖多种电转的应用，这样就可以减少不同实验之间的方法迁移的成本。

对于科研项目而言，可以重复要比偶然出现一次高效率更重要

很多实验结果问题并不是真的“做不出来"，而是在于“这次做出来了，下次又重复不出来"。

特别是在研究要形成论文数据、建立标准方法或者继续推进产业化验证的时候，可重复性的意义就会越来越大。

就客户的使用情况而言，我们更希望电转染设备可以做到以下三点：

参数可以被正确地设定；

实验的过程可以真实的被记录下来；

异常结果可以找到分析依据。

V-leader 开云网页版登录入口 Gene Pulser 630 将指数衰减波电穿孔、脉冲波形显示、参数记录、样品电阻检测以及异常放电保护整合到同一平台中。

对于基因编辑、细胞功能验证和长期项目化的研究来说，该设计的主要价值并不是为了增加几个仪器的功能，而是在于使原来需要高度的操作经验来完成的电转染过程，最终发展成为能够进行标准化、数据化的管理的实验步骤。