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诚信经营质量保障价格合理服务贴心准备购买电穿孔仪时,不少客户会遇到一个看似简单的问题:
“我要做的到底属于电转染,还是电转化?"
如果只是看设备名称,很容易越看越乱。
有的设备叫电穿孔仪,有的叫电转仪,有的强调电转染,还有的强调电转化。
实际上,与其纠结设备叫什么,不如先从实验本身出发。
了解电转染和电转化的区别之后,设备选择会简单很多。
如果实验对象主要包括:
HEK293、CHO等常见细胞;
原代细胞;
干细胞;
T细胞;
NK细胞;
PBMC;
肿瘤细胞;
其他哺乳动物细胞,
并且实验目的是导入DNA、RNA、mRNA、siRNA或者CRISPR相关分子,那么通常属于电转染场景。
如果实验对象主要是:
大肠杆菌;
酵母;
其他细菌或微生物,
目的是将质粒DNA等外源遗传物质导入细胞,则通常称为电转化。
当然,不同领域的术语使用并不是绝对统一,但对于设备选型来说,这种分类已经能够解决大部分问题。
不同样品需要的电穿孔条件可能差别很大。
例如,某些微生物电转需要较高电场强度,而部分哺乳动物细胞则需要更加细致地控制脉冲时间和能量。
一些细胞甚至不是“能不能转进去"的问题,而是如何在保证效率的同时减少损伤。
因此,如果实验室未来需要覆盖多个应用,设备就应该具备足够宽的参数调节能力。
这也是很多实验室第一次采购设备时容易忽略的问题。
当前只做一种样品,于是购买了参数范围非常有限的设备。
半年后项目增加,需要做另一种细胞或者微生物,才发现设备无法覆盖。
最终只能重新采购。
电穿孔设备常见输出形式包括指数衰减波和方波。
指数衰减波是在脉冲产生后,电压按照一定规律逐渐衰减。
这类波形在经典电穿孔实验中应用广泛,很多细菌、酵母以及部分细胞实验都有成熟参考方案。
方波则可以在设定时间内维持相对稳定的电压输出,对脉冲宽度和脉冲次数进行更加直接的控制。
不同实验体系可能采用不同波形。
因此,如果实验室研究方向比较固定,可以根据已有方法选择相应设备。
如果属于综合实验平台或者未来实验类型变化较多,则可以考虑参数覆盖能力更全面的方案。
与其只问:
“你们这个设备能不能做电转染?"
不如直接提供以下信息:
第一,具体细胞或菌种名称。
第二,需要导入的物质。
第三,目前参考的文献参数。
第四,实验使用的电转杯规格。
第五,希望达到的主要结果。
比如:
“我们主要做T细胞,准备导入mRNA,目前希望重点保证细胞活率。"
这句话对于设备选型的价值,远远高于一句:
“我要买一台电转仪。"
因为厂家只有知道实际实验需求,才能判断设备参数是否匹配。
科研实验真正让人头疼的并不是第一次失败,而是结果不稳定。
第一次70%,第二次40%,第三次又变成60%。
如果细胞、试剂以及实验操作已经尽量标准化,设备输出稳定性就非常重要。
尤其在进行长期项目、批量实验或者药物研发时,重复性直接影响数据是否具有分析价值。
因此设备选择时,可以重点考察:
参数控制精度;
脉冲输出稳定性;
程序保存能力;
操作流程是否方便;
耗材匹配情况;
厂家是否能够提供技术支持。
V-leader开云网页版登录入口Gene Pulser系列围绕不同电穿孔需求提供多种设备方案,可覆盖细胞电转染、微生物电转化及相关分子导入实验。
对于客户来说,没有必要为了一个当前用不到的参数盲目购买最高配置,但也不建议为了节省一次采购成本,把未来明显会使用的实验需求忽略。
如果目前正在比较多个品牌,可以自己先列一个简单清单:
现在主要做什么样品?
未来两到三年可能增加什么实验?
有没有现成文献参数?
是否需要方波?
是否需要指数衰减波?
电压范围要求多大?
脉冲时间需要覆盖什么区间?
每天实验频率大概多少?
哪些样品比较珍贵?
把这些问题写清楚之后,再去比较设备,判断会更加客观。
电转染和电转化的区别,本质上不是两个产品名称之间的区别,而是两个实验应用体系之间的区别。
最终选择什么设备,应该由样品和实验目标决定,而不是被设备名称带着走。